ما هو غش اللقاحات ولماذا يجب أن تهتم به؟

في الآونة الأخيرة، كان هناك الكثير من النقاش بين المطلعين وأولئك الذين يتابعون عن كثب قصة "لقاح mRNA" لفيروس كورونا فيما يتعلق بتلوث لقاحات mRNA بشظايا الحمض النووي التي تتضمن تسلسلات الحمض النووي المشتقة من فيروس Simian Virus 40 (SV40).

هل هذا مجرد آخر داخل البيسبول عاصفة في إبريق شاي، على غرار العديد من المؤامرات الهامشية التي يروج لها "خبراء/منظرو وسائل التواصل الاجتماعي"، والخلافات التي تضخمها إباحية الخوف بشأن أكسيد الجرافين، أو هيدرا الحية أو سم الثعبان في اللقاحات، أو أن جسيمات الحمض النووي الريبوزي الدهني الكاذب هي في الواقع الروبوتات النانوية للخيال العلمي في القرن الرابع والعشرين من سلسلة Star-Trek والتي سوف تعيد برمجة جميع أدمغتنا؟ 

هل قضية تلوث/غش الحمض النووي هي الشيء الحقيقي، الذي يجب أن يثير قلقك بالفعل - والمحاكم؟

الدكاترة. ديفيد سبايشر، وكيفن ماكيرنان وزملاؤه هم في الواقع خبراء علميون وتقنيون جادون في الحياة الواقعية، في التطبيق العملي لمنهجية التحليل البيولوجي الجزيئي. وهذا ما يفعلونه، يومًا بعد يوم، من أجل لقمة العيش. والذي يصادف أنه المجال الفني المحدد الذي يقومون بإعداد التقارير عنه. 

هؤلاء ليسوا هامشيين"مستنقع الحمى"منظري المؤامرة (مصطلح ستيف بانون).

دكتور ديفيد ج. سبايشر، قسم علم الأحياء المرضي بجامعة جيلف، 50 Stone Rd E، Guelph، ON، N1G 2W1، speicher@uoguelph.ca، أوركيد 0000-0002-1745-3263

ما لاحظه سبايكر وآخرون وأبلغ عنه في هذه المخطوطة العلمية مرتبطة أدناه يُظهر بوضوح الفشل الذريع لإدارة الغذاء والدواء والسلطات التنظيمية العالمية في القيام بعملها الأكثر أهمية - وهو ضمان نقاء المستحضرات الصيدلانية وعدم غشها والتي تسمح بتسويقها واستخدامها من قبل الأطباء والمهنيين الصحيين المتحالفين معهم. 

على أقل تقدير، يُظهر مرة أخرى العمى المتعمد المتفشي الذي يبدو أنه قد انتشر في فرع اللقاحات التابع لإدارة الغذاء والدواء الأمريكية/CBER تحت توجيهات "المؤمن الحقيقي" للدكتور بيتر ماركس، وهو ليس خبيرًا في اللقاحات، ولا عالم مناعة، ولا عالمًا جزيئيًا. عالم أحياء، ولا أي شخص لديه أي فهم لطريقة توصيل عديد النوكليوتيدات غير الفيروسية المستندة إلى الجسيمات الدهنية النانوية، بل هو بالأحرى عالم أحياء. طبيب أمراض الدم السريري / الأورام من هو المنشئ الأولي والمؤيد المستمر لنهج "عملية الاعوجاج السريعة" لتطوير اللقاح (والآن دواء السرطان). وهذا يعني تجاوز جميع الإجراءات العادية والدروس المستفادة تقريبًا من عقود من التطوير والتصنيع والموافقة على التسويق ومراقبة ما بعد التسويق للمنتجات البيولوجية والدوائية.

والأمر الأسوأ من ذلك هو أن هذه المعلومات الجديدة تظهر بمظهر "دليل دامغ" يبرهن على التواطؤ الفاسد بين السلطات التنظيمية الصيدلانية في الولايات المتحدة وغيرها من الدول الإدارية الغربية وصناعة الأدوية.

وبناءً على تقييمي الشخصي لهذه البيانات، يبدو أن هذا التلوث يفي بالمعايير الرسمية "للغش" الصيدلاني، وهو ما يحظره القانون الفيدرالي الأمريكي بشكل صارم. يعد منع "غش" الأدوية والأجهزة والأغذية إحدى المهام المركزية لإدارة الغذاء والدواء - وهو في الأساس السبب الرئيسي وراء إنشاء إدارة الغذاء والدواء في المقام الأول. 

أحد الأسئلة الرئيسية التي لا تزال دون حل هو كيف حدث هذا؟ 

هل كان هذا الغش معروفًا من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA)، ووكالة الأدوية الأوروبية (EMA)، و معهد بول إيرليك, الصحة كندا الخ ومخفية عن الجمهور؟ إذا لم يكن معروفًا، فكيف أفلت هذا الغش من اكتشافه من قبل جميع الخبراء التنظيميين الحكوميين المعتمدين في الدول الغربية تقريبًا؟

فيما يلي لقطة شاشة للتغريدة مع وصلة إلى المخطوطة المطبوعة مسبقًا والتي أطلقت هذه العاصفة النارية الأخيرة. 

ملخص

خلفيّة: تعتمد تفاعلات النسخ في المختبر (IVT) المستخدمة لتوليد RNA المعدل بالنيوكليوسيد (modRNA) للقاحات SARS-CoV-2 حاليًا على نسخ بوليميريز RNA من قالب الحمض النووي. استخدم إنتاج modRNA المستخدم في التجربة السريرية العشوائية الأصلية لشركة Pfizer (RCT) قالب الحمض النووي الناتج عن تفاعل البوليميراز المتسلسل (العملية 1). لتوليد مليارات من جرعات اللقاح، تم استنساخ هذا الحمض النووي في ناقل بلازميد بكتيري لتضخيمه في الإشريكية القولونية قبل عملية الخطية (العملية 2)، مما أدى إلى توسيع حجم وتعقيد الحمض النووي المتبقي المحتمل وإدخال تسلسلات غير موجودة في قالب العملية 1. يبدو أن موديرنا استخدمت عملية مماثلة تعتمد على البلازميد في كل من التجارب السريرية ولقاحات الاستخدام بعد التجربة. في الآونة الأخيرة، كشفت دراسات تسلسل الحمض النووي عن هذا الحمض النووي البلازميدي بمستويات كبيرة في كل من لقاحات Pfizer-BioNTech وModerna modRNA. قامت هذه الدراسات بمسح عدد محدود من القطع ولا تزال هناك أسئلة بخصوص التباين في الحمض النووي المتبقي الذي تمت ملاحظته دوليًا. 

الأساليب: باستخدام تسلسلات التمهيدي والمسبار المنشورة مسبقًا، تم إجراء تفاعل البلمرة المتسلسل الكمي (qPCR) وقياس التألق Qubit® على 27 قارورة mRNA إضافية تم الحصول عليها في كندا وتم استخلاصها من 12 مجموعة فريدة (5 مجموعات من موديرنا أحادي التكافؤ للأطفال/البالغين، ومجموعة واحدة من موديرنا ثنائي التكافؤ للبالغين BA.1/4، مجموعة واحدة من Moderna للأطفال/البالغين ثنائي التكافؤ BA.5، مجموعة واحدة من Moderna XBB.1 أحادي التكافؤ، 1 دفعات من Pfizer للبالغين أحادي التكافؤ، ومجموعة واحدة من Pfizer ثنائي التكافؤ للبالغين BA.1/1.5). تم الاستعلام عن قاعدة بيانات نظام الإبلاغ عن الأحداث الضائرة الخاصة باللقاحات (VAERS) لمعرفة عدد وتصنيف الأحداث الضائرة (AEs) المُبلغ عنها لكل مجموعة من الدفعات التي تم اختبارها. تم فحص محتوى قارورة واحدة من لقاح فايزر لكوفيد-3 تمت دراستها مسبقًا بواسطة تسلسل Oxford Nanopore لتحديد توزيع حجم شظايا الحمض النووي. تم استخدام هذه العينة أيضًا لتحديد ما إذا كان الحمض النووي المتبقي معبأًا في الجسيمات النانوية الدهنية (LNPs) وبالتالي مقاومًا لـ DNaseI أو إذا كان الحمض النووي موجودًا خارج LNP وهو قابل للتسمية DNaseI.  

النتائج: تراوحت قيم دورة القياس الكمي (Cq) (التخفيف 1:10) لأصل البلازميد للتكرار (ori) وتسلسلات السنبلة من 18.44 إلى 24.87 ومن 18.03 إلى 23.83 بالنسبة لشركة Pfizer، و22.52 – 24.53 و25.24 – 30.10 بالنسبة لشركة Moderna، على التوالي. تتوافق هذه القيم مع 0.28 - 4.27 نانوجرام / جرعة و0.22 - 2.43 نانوجرام / جرعة (فايزر)، و0.01 -0.34 نانوجرام / جرعة و0.25 - 0.78 نانوجرام / جرعة (موديرنا)، للأوري والارتفاع المقاسين على التوالي بواسطة qPCR، و1,896 – 3,720 نانوغرام/جرعة و3,270 – 5,100 نانوغرام/جرعة تم قياسها بواسطة قياس التألق Qubit® لشركتي Pfizer وModerna، مع الاحترام. تم اكتشاف مُعزز مُعزز SV40 فقط في قوارير Pfizer مع درجات Cq تتراوح بين 16.64 - 22.59. في تحليل استكشافي، وجدنا أدلة أولية على وجود علاقة بين الاستجابة للجرعة وكمية الحمض النووي لكل جرعة وتواتر الأحداث السلبية الخطيرة (SAEs). وكانت هذه العلاقة مختلفة بالنسبة لمنتجات فايزر وموديرنا. وجد تحليل توزيع الحجم متوسطًا وأقصى أطوال لشظايا الحمض النووي تبلغ 214 زوجًا أساسيًا (bp) و3.5 كيلو بايت على التوالي. من المحتمل أن يكون DNA البلازميد موجودًا داخل LNPs وهو محمي من النيوكلياز. 

الخلاصة: وتظهر هذه البيانات وجود مليارات إلى مئات المليارات من جزيئات الحمض النووي لكل جرعة في هذه اللقاحات. باستخدام قياس الفلورة، تتجاوز جميع اللقاحات المبادئ التوجيهية للحمض النووي المتبقي التي حددتها إدارة الغذاء والدواء ومنظمة الصحة العالمية والتي تبلغ 10 نانوجرام/جرعة بمقدار 188 - 509 أضعاف. ومع ذلك، كان محتوى الحمض النووي المتبقي لـ qPCR في جميع اللقاحات أقل من هذه المبادئ التوجيهية التي تؤكد على أهمية الوضوح المنهجي والاتساق عند تفسير المبادئ التوجيهية الكمية. إن الأدلة الأولية على تأثير الاستجابة للجرعة من الحمض النووي المتبقي المقاسة باستخدام qPCR وSAEs تستدعي التأكيد وإجراء مزيد من التحقيق. توسع النتائج التي توصلنا إليها المخاوف الحالية بشأن سلامة اللقاحات وتثير تساؤلات حول مدى أهمية المبادئ التوجيهية التي تم وضعها قبل إدخال ترنسفكأيشن فعال باستخدام LNPs. ومع وجود العديد من القيود الواضحة، فإننا نحث على تكرار عملنا في ظل ظروف الطب الشرعي ومراجعة المبادئ التوجيهية لمراعاة ترنسفكأيشن الحمض النووي عالي الكفاءة والجرعات التراكمية.

يمكنك مراجعة المخطوطة الكاملة بنفسك من خلال بعد هذا الرابط.

فهم العلم وراء هذه النتيجة.

لمتابعة الجوانب الفنية ومعنى ما تم اكتشافه وإثباته، تحتاج إلى فهم بعض أساسيات البيولوجيا الجزيئية. سأبذل قصارى جهدي لشرح وتوفير السياق اللازم لأولئك الذين لم يتلقوا تدريبًا جامعيًا في قسم البيولوجيا الجزيئية العليا. أعترف بأنني قريب جدًا من الموضوع، وأحيانًا أفترض الكثير من المعرفة الأساسية. إذا كان الأمر كذلك، بلدي سيئة. مثل يعود الفضل إلى البروفيسور ريتشارد فاينمان في قوله"إذا لم تتمكن من شرح شيء ما بعبارات بسيطة، فأنت لا تفهمه." سأحاول أن أرقى إلى مستوى معاييره.

علينا أن نبدأ بـ "العقيدة المركزية" لعلم الأحياء. الحمض النووي يصنع الحمض النووي الريبي (RNA)، والحمض النووي الريبي (RNA) يصنع البروتين.  

إذا كنت ترغب في تصنيع كميات كبيرة من الحمض النووي الريبوزي النقي، فأنت بحاجة بشكل أساسي إلى البدء بكميات كبيرة من الحمض النووي، واستخدام إنزيم البروتين (العاثية البكتيرية) بوليميريز T7 RNA بطريقتي الأصلية، والذي لا يزال يستخدم) بالإضافة إلى وحدات فرعية كيميائية من الحمض النووي الريبي (RNA) ومصدر للطاقة (ATP) لصنع الحمض النووي الريبي (RNA) من الحمض النووي (DNA). ثم تحتاج إلى تحطيم الحمض النووي إلى أجزاء صغيرة مع ترك الحمض النووي الريبي الأكبر سليمًا. ثم تحتاج إلى تنقية أجزاء الحمض النووي الصغيرة من الحمض النووي الريبي الأكبر. في عمليتي الأصلية، تم ذلك باستخدام نوع من المرشحات (التحليل اللوني للهلام) الذي يسمح لشظايا الحمض النووي الصغيرة المتحللة والوحدات الفرعية الكيميائية الصغيرة غير المستخدمة بالمرور بسرعة أكبر من جزيئات الحمض النووي الريبي (RNA) الكبيرة. ومن ثم تتخلص مما يخرج أولاً - الأشياء الصغيرة (أجزاء الحمض النووي والمواد الكيميائية غير المستخدمة) وتحتفظ بالأشياء الكبيرة التي تأتي لاحقًا - والتي هي في الأساس RNA نقي مذاب في الماء. 

هل هذا منطقي؟ 

بعد ذلك، بمجرد حصولك على هذا الحمض النووي الريبوزي المنقى ذو الشحنة السالبة في الماء، يمكنك جعله أكثر أو أقل تركيزًا، وخلطه بطرق رائعة مع أشياء أخرى مثل التجميع الذاتي للدهون موجبة الشحنة لإنتاج جسيمات دهنية نانوية، وتخزينها في قارورة زجاجية، و حقنه في الناس. وهذه هي عملية تصنيع لقاحات الرنا المرسال الزائف باختصار.

تسأل ما الذي يمكن أن يحدث بشكل خاطئ؟

في هذه الحالة، يبدو أن شيئين على الأقل قد حدث خطأ. الأول يتضمن الحمض النووي الذي يستخدم لتصنيع الحمض النووي الريبي (RNA). . والثاني ينطوي على عملية تحلل وتنقية الحمض النووي المستخدمةأيضا كما نوقش أعلاه>. 

يبدو أن هناك طريقتين مختلفتين تم استخدامهما لتصنيع الحمض النووي. استخدمت عملية التصنيع الأصلية المستخدمة في التجارب السريرية الأولية تفاعل البوليميراز المتسلسل، والذي يمكن استخدامه لصنع أجزاء خطية أكبر من الحمض النووي (الدقة مشكلة إلى حد ما)، والتي تم استخدامها بعد ذلك لإنتاج الحمض النووي الريبي (RNA). وتبين أن هذا أمر صعب للغاية ومكلف ويستغرق وقتًا طويلاً وما إلى ذلك لدعم التصنيع الضخم بالمستوى المطلوب لدعم الجرعات في جميع أنحاء العالم. لذا يبدو أن شركتي Pfizer/BioNTech وModerna قد عادتا إلى الطريقة الأصلية التي استخدمتها، والتي تعتمد على الحمض النووي "البلازميد" الدائري الذي يتم إنتاجه باستخدام البكتيريا (سلالات مختبرية خاصة من البكتيريا). E. كولاي، وهي البكتيريا التي توجد عادة في أمعائك). 

يمكنك التفكير في البلازميدات وكأنها أنقى أشكال الفيروسات البكتيرية. هناك أشياء أخرى تشبه الفيروسات تصيب البكتيريا (تسمى العاثيات)، لكن البلازميدات عبارة عن حمض نووي دائري يمكنه أن يصيب البكتيريا حرفيًا كحمض نووي نقي، ويمكنه توجيه تلك البكتيريا لنقل نفسها والبلازميدات الأخرى من بكتيريا إلى أخرى. 

تشبه هذه البلازميدات دوائر الحمض النووي الطفيلية الصغيرة التي غالبًا ما تساعد المضيف البكتيري على البقاء على قيد الحياة بشكل أفضل في ظل ظروف معينة مثل التعرض للمضادات الحيوية، وتحت ضغوط الانتقاء هذه، تحافظ البكتيريا على البلازميدات لأنها توفر ميزة البقاء أو التكاثر. إذا لم يوفر البلازميد ميزة، فإن البكتيريا المماثلة الأخرى سوف تتفوق على تلك التي لديها البلازميد، لأن هناك تكلفة على المضيف البكتيري للحفاظ على البلازميد الطفيلي. . 

إذا كنت ترغب في تنمية واستعادة (تصنيع ergo) أكبر قدر ممكن من الحمض النووي البلازميدي في ثقافة E. كولاي البكتيريا، فأنت تريد استخدام أصغر بلازميد وأكثره تجريدًا يمكن هندسته. لأن أي تسلسل إضافي للحمض النووي في البلازميد سيأتي بسعر أقل لإنتاج البلازميد لكل لتر في المزرعة البكتيرية الناتجة. ولذلك، فأنت لا تريد إضافة تسلسلات الحمض النووي إلى ذلك البلازميد الذي لا تحتاجه لنسخ البلازميد، واختيار المضادات الحيوية (كاناميسين أو نيومايسين في هذه الحالة)، وتصنيع الحمض النووي الريبي (RNA) في نهاية المطاف. هل هذا الجزء منطقي بالنسبة لك؟

فلماذا، بحق السماء، أي شركة تقوم بتطوير ونشر عملية تصنيع قائمة على البلازميد لتخليق الحمض النووي الريبي (RNA) على نطاق واسع من قالب الحمض النووي (DNA) تتضمن تسلسلات في البلازميد ليست ضرورية للغرض المقصود؟ لماذا نضيف تسلسلات مستخرجة من فيروس الحمض النووي المعروف (الذي يسبب السرطان) مثل Simian Virus 40 (SV40)؟ 

اتضح أن تسلسلات SV40 المحددة هذه والتي تم تحديدها في تلوث شظية DNA البلازميدية الموثقة (أعلاه) بواسطة Speicher et al تُستخدم بشكل شائع في نوع معين من البلازميد البكتيري الهندسي الذي تم تطويره منذ عقود مضت ليستخدمه علماء الأحياء الجزيئية. هذه هي تقنية الحمض النووي المؤتلف "الأساسية المشتركة" الراسخة. 

يمكن هندسة البلازميدات البكتيرية منذ فترة طويلة لتكرار وإنتاج الحمض النووي الريبي (والبروتينات) في كل من البكتيريا والخلايا الحيوانية. تسمى هذه البلازميدات في الصناعة باسم "النواقل المكوكية". ويمكن تصنيعها وتنقيتها بكميات كبيرة باستخدام المختبر E. كولاي سلالات، ومن ثم نقلها ("العدوى") إلى خلايا حيوانية حيث يمكنها التكاثر لفترة من الزمن (في بعض الظروف) وإنتاج الحمض النووي الريبي (RNA) والبروتين محل الاهتمام في الخلايا الحيوانية - تحت سيطرة تسلسلات مشتقة من SV-40 غير المتجانسة في هذه الحالة.

إذًا ما الذي تفعله تسلسلات SV-40 في البلازميدات التي يكون غرضها الوحيد هو تنقيتها واستخدامها لإنتاج كميات كبيرة من الحمض النووي الريبي (RNA) "في أنبوب الاختبار" باستخدام عملية تصنيع قائمة على الإنزيمات التجارية؟ سؤال جيد. 

يمكنني التكهن أو الافتراض، لكنني أقترح أن مهمة السيد فارما والسيد المنظم الحكومي هي الإجابة على هذا السؤال. ولمعالجة سبب عدم الكشف عن ذلك للجمهور مطلقًا، ناهيك عن إخضاعه لأي تقييم رسمي للمخاطر المحتملة عندما يتم تسليم أجزاء صغيرة من SV-40 وتسلسلات DNA البلازميدية الأخرى (بما في ذلك أجزاء الجينات المقاومة للمضادات الحيوية) إلى أجسام المرضى الذين يستخدمون تكنولوجيا التوصيل غير الفيروسية النظامية الأكثر كفاءة في الجسم الحي التي تم تطويرها على الإطلاق في تاريخ العالم.

هل يمكنني تخيل المخاطر المحتملة؟ 

باختصار، نعم. بطريقة أو بأخرى، من المرجح أن تؤثر هذه الأجزاء على الأقل على التعبير الجيني في الخلايا البشرية التي تتناول الحمض النووي. واحد ممكن وقد يشمل التأثير تطور السرطانات، وهو ما يطلق عليه علماء الأحياء الجزيئية والباحثون في مجال السرطان تحول (لاحظ التركيز). هل كان ينبغي التحقيق في هذه المخاطر قبل السماح بحدوث أي من ذلك وحقنه في البشر (دون علمهم)؟ بالطبع ينبغي أن يكون لديهم. ومن البديهي أيضًا أن هذا كله كان ينبغي الكشف عنه لجميع المعنيين. إذا كانت إدارة الغذاء والدواء الأمريكية، EMA، معهد بول إيرليك, الصحة كندا وما إلى ذلك لم يتم إبلاغهم، فهذا سيكون احتيالًا. اذا هم كانأبلغ ولم يفعل شيئا، من شأنه أن يكون الإهمال الجنائيفي رأيي، ولكن أنا دكتوراه في الطب، وليس دينارا>.

ومع ذلك، هناك تحذير مهم فيما يتعلق بتسلسلات SV40 في بلازميدات Pfizer/BioNTech وModerna والتي نادرًا ما يتم ذكرها في المناقشات الحالية، وهو أن الآلية الأساسية التي من خلالها يقود SV40 تطور الأورام الصلبة (الأورام اللحمية) هي " بروتين مستضد T الكبير الذي ينتجه الفيروس. تسلسل الحمض النووي لهذا البروتين غير موجود في أي من هذه البلازميدات.

أتوقع حدوث إعصار من دعاية مدققي الحقائق، والتعتيم، والحداثة التي أثيرت حول كل هذا، لكن الحقائق الأساسية لا جدال فيها.

يرسل من Substack